Dette er en type enzym, der katalyserer (fremskynder) reaktioner, hvor der foretages overførsler af phosphatgrupper, specielt hexokinase arbejder på phosphorylering af glucose til dannelse af en ny forbindelse kaldet "glucose-6-phosphat" (fordi fosforgruppe er placeret på kulstof nummer 6 i glukose). I den biokemiske reaktion, at virkningen af hexokinase er påkrævet, er det processen med glykolyse eller nedbrydning af glukose specifikt i muskler og andre væv såsom hjerne, røde blodlegemer og blandt andet nedbrydning af glukose resulterer i produktion af pyruvinsyre eller pyruvat; reaktionen af glykolyse omvendt resulterer i dannelsen af glucose fra ikke- kulstofforbindelser eller glukogenogenese og forekommer på leverniveau.
Imidlertid blev dette enzym derefter henvist til som hexokinase på grund af ordets etymologiske betydning, "kinase" indikerer, at enzymet producerer phosphorylering (tilføjer en phosphorgruppe til reaktionen), og "hexo" henviser til, at reaktionen er Det forekommer i hexoser, disse er en gruppe af kulhydrater eller sukkerarter, der er sammensat af 6 carbonatomer, inden for denne gruppe er blandt andet glucose, fruktose, mannose. En af de essentielle kemiske forbindelser til korrekt funktion af hexokinase er magnesium, dette hæmmer de negative ladninger af ilt eller ATP, hvilket letter kombinationen af phosphatgruppen med hexose, og det virker derfor ikke uden tilstedeværelsen af magnesium.
Hexokinase har et isoenzym (de er forskellige, men har samme funktion) dette kaldes glucokinase, forskellen mellem de to er lokaliseringsstedet, hexokinase findes i alle cellulære væv, der kræver glukose som energikilde, mens at glucokinase kun er placeret i hepatocytter, det er celler, der udgør det, der er levervæv(lever). Begge udfører den samme funktion, phosphorylerer glukose, så den ikke undslipper fra cellen, fælder den for at udføre glykolyseprocessen. En anden vigtig forskel mellem begge enzymer er forbindelsen, der hæmmer dens funktion, hexokinase holder op med at arbejde, hvis den er besat glucose-6-phosphat i høje koncentrationer, mens glucokinase inhiberes af store mængder fructose-6-phosphat.